Eskerrik asko Nature.com bisitatzeagatik.Erabiltzen ari zaren arakatzailearen bertsioak CSS laguntza mugatua du.Emaitza onenak lortzeko, zure arakatzailearen bertsio berriagoa erabiltzea gomendatzen dizugu (edo Internet Explorer-en bateragarritasun modua desgaitzea).Bitartean, etengabeko laguntza bermatzeko, gunea estilorik edo JavaScript gabe erakusten ari gara.
Landare-jatorriko konposatu intsektiziden konbinazioak izurriteen aurkako elkarrekintza sinergikoak edo antagonikoak izan ditzakete.Aedes eltxoek eramandako gaixotasunen hedapen azkarraren ondorioz eta Aedes eltxoen populazioek intsektizida tradizionalekiko duten erresistentzia gero eta handiagoa dela ikusita, landare-olioetan oinarritutako terpeno-konposatuen hogeita zortzi konbinazio formulatu eta probatu ziren Aedes aegypti-ren larba eta helduen fasearekin.Bost landare-olio esentzialak (EO) hasiera batean ebaluatu ziren beren larbizida eta helduentzako erabileraren eraginkortasunagatik, eta EO bakoitzean bi konposatu nagusi identifikatu ziren GC-MS emaitzetan oinarrituta.Identifikatutako konposatu nagusiak erosi ziren, hots, dialil disulfuroa, dialil trisulfuroa, karvona, limonenoa, eugenola, metil eugenola, eukaliptola, eudesmol eta eltxo alfa-pinenoa.Ondoren, konposatu horien konbinazio bitarrak prestatu ziren dosi subletalak erabiliz eta haien efektu sinergiko eta antagonikoak probatu eta zehaztu ziren.Konposizio larbizida onenak limonenoa dialil disulfuroarekin nahastuz lortzen dira, eta konposizio adultizida onenak karvona limonenoarekin nahastuz lortzen dira.Komertzialki erabiltzen den Temphos larbizida sintetikoa eta Malathion droga heldua bereizita eta konbinazio bitar probatu ziren terpenoideekin.Emaitzek erakutsi zuten temefos eta dialil disulfuroaren eta malathion eta eudesmol konbinazioa izan zela konbinazio eraginkorrena.Konbinazio indartsu hauek Aedes aegyptiren aurka erabiltzeko ahalmena dute.
Landare-olio esentzialak (EO) konposatu bioaktibo desberdinak dituzten metabolito sekundarioak dira eta gero eta garrantzi handiagoa dute pestizida sintetikoen alternatiba gisa.Ingurumena errespetatzen dutenak eta erabilerrazak izateaz gain, konposatu bioaktibo ezberdinen nahasketa bat ere bada, eta horrek botiken erresistentzia garatzeko probabilitatea murrizten du1.GC-MS teknologia erabiliz, ikertzaileek landare-olio esentzial batzuen osagaiak aztertu zituzten eta 17.500 landare aromatikoren 3.000 konposatu baino gehiago identifikatu zituzten2, horietako gehienak propietate intsektizidak probatu zituzten eta efektu intsektizidak dituztela jakinarazi zuten3,4.Ikerketa batzuek azpimarratzen dute konposatuaren osagai nagusiaren toxikotasuna bere etileno oxido gordinaren berdina edo handiagoa dela.Baina konposatu indibidualen erabilerak berriz ere erresistentzia garatzeko lekua utzi dezake, intsektizida kimikoekin gertatzen den bezala5,6.Hori dela eta, etileno oxidoan oinarritutako konposatuen nahasketak prestatzea da egungo fokua, intsektizida eraginkortasuna hobetzeko eta xede-izurriteen populazioetan erresistentzia izateko probabilitatea murrizteko.EOetan dauden konposatu aktibo indibidualek efektu sinergiko edo antagonikoak izan ditzakete EOaren jarduera orokorra islatzen duten konbinazioetan, aurreko ikertzaileek egindako ikerketetan ongi azpimarratu dena7,8.Kontrol bektorialaren programak EO eta bere osagaiak ere barne hartzen ditu.Olio esentzialen eltxoen jarduera sakon aztertu da Culex eta Anopheles eltxoetan.Hainbat ikerketak pestizida eraginkorrak garatzen saiatu dira hainbat landare komertzialki erabiltzen diren pestizida sintetikoekin konbinatuz, toxikotasun orokorra areagotzeko eta albo-ondorioak minimizatzeko9.Baina Aedes aegyptiren aurkako konposatu horien azterketak arraroak izaten jarraitzen dute.Medikuntza zientziaren aurrerapenek eta sendagaien eta txertoen garapenak bektoreek transmititutako gaixotasun batzuen aurka borrokatzen lagundu dute.Baina Aedes aegypti eltxoak transmititutako birusaren serotipo ezberdinen presentziak txerto-programen porrota ekarri du.Hori dela eta, horrelako gaixotasunak gertatzen direnean, bektoreak kontrolatzeko programak dira gaixotasunaren hedapena saihesteko aukera bakarra.Egungo egoeran, Aedes aegypti-ren kontrola oso garrantzitsua da, denge sukarra, Zika, dengue hemorragikoa, sukar horia... eragiten duten hainbat birusen eta haien serotipoen funtsezko bektorea baita. Aedes-ek transmititutako ia gaixotasun bektorialen kasuak urtero handitzen ari dira Egipton eta handitzen ari dira mundu osoan.Beraz, testuinguru honetan, premiazkoa da Aedes aegypti populazioentzat ingurumena errespetatzen duten eta eraginkorrak diren kontrol neurriak garatzea.Zentzu honetan hautagai potentzialak EOak, haien konposatuak eta haien konbinazioak dira.Hori dela eta, ikerketa honek propietate intsektizidak dituzten bost landaretako (hau da, menda, albahaka santua, eukaliptoa, Allium sufre eta melaleuca) konbinazio sinergiko eraginkorrak identifikatzen saiatu da Aedes aegyptiren aurka.
Hautatutako EO guztiek Aedes aegypti-ren aurkako jarduera larbizida potentziala erakutsi zuten 24 orduko LC50 0,42 eta 163,65 ppm artekoarekin.Jarduera larbizidarik handiena 24 orduko 0,42 ppm-ko LC50 balioarekin 24 ordutan (Mp) EO-rekin erregistratu zen, baratxuri (As) 24 ordutan 16,19 ppm-ko LC50 balioarekin (1. taula).
Ocimum Sainttum, Os EO izan ezik, bahetutako beste lau EOek efektu alergiko nabariak erakutsi zituzten, LC50 balioak 23,37 eta 120,16 ppm bitartekoak izan dira 24 orduko esposizio-aldian.Thymophilus striata (Cl) EO izan zen eraginkorrena 23,37 ppm-ko LC50 balioa zuten helduak hiltzeko esposizioaren 24 orduetan, eta ondoren Eucalyptus maculata (Em) 101.91 ppm-ko LC50 balioa zuen (1. taula).Bestalde, Os-en LC50 balioa oraindik ez da zehaztu, % 53ko hilkortasun-tasa handiena dosi altuenean erregistratu baitzen (3. irudi osagarria).
EO bakoitzeko bi konposatu nagusiak identifikatu eta hautatu ziren NIST liburutegiko datu-basearen emaitzetan, GC kromatograma-eremuaren ehunekoan eta MS espektroen emaitzetan (2. taula).EO As-erako, identifikatutako konposatu nagusiak dialil disulfuroa eta dialil trisulfuroa izan dira;EO Mp-rako identifikatutako konposatu nagusiak karvona eta limonenoa izan ziren, EO Em-rako identifikatutako konposatu nagusiak eudesmol eta eukaliptola;EO Os-entzat, identifikatutako konposatu nagusiak eugenol eta metil eugenol izan ziren, eta EO Cl-rako, identifikatutako konposatu nagusiak eugenol eta α-pineno (1. irudia, 5-8 irudi osagarriak, 1-5 taula osagarria).
Hautatutako olio esentzialen terpenoide nagusien masa-espektrometriaren emaitzak (A-dialil disulfuroa; B-dialil trisulfuroa; C-eugenol; D-metil eugenol; E-limonenoa; F-zeperona aromatikoa; G-α-pinenoa; H-zineola R-eudamol).
Guztira bederatzi konposatu (dialil disulfuroa, dialil trisulfuroa, eugenola, metil eugenola, karvona, limonenoa, eukaliptola, eudesmol, α-pinenoa) konposatu eraginkor gisa identifikatu ziren, EOaren osagai nagusiak diren eta banan-banan Aedes aegypti-ren aurkako biosaiaketa larbatan. etapak..Eudesmol konposatuak jarduera larbizidarik handiena izan zuen 2,25 ppm-ko LC50 balioarekin 24 orduko esposizioaren ondoren.Dialil disulfuroa eta dialil trisulfuroa ere aurkitu da efektu larbizida potentzialak dituztela, 10-20 ppm bitarteko batez besteko dosi subletalekin.Jarduera larbizida moderatua berriro ikusi zen eugenol, limoneno eta eukaliptol konposatuentzat 63,35 ppm, 139,29 ppm LC50 balioekin.eta 181,33 ppm 24 ordu igaro ondoren, hurrenez hurren (3. taula).Hala ere, ez zen metil eugenolaren eta karvonaren potentzial larbizida esanguratsurik aurkitu dosi handienetan ere, beraz, LC50 balioak ez ziren kalkulatu (3. taula).Temephos larbizida sintetikoak 0,43 ppm-ko batez besteko kontzentrazio hilgarria izan zuen Aedes aegyptiren aurka 24 orduko esposizioan (3. taula, 6. taula osagarria).
Zazpi konposatu (dialil disulfuroa, dialil trisulfuroa, eukaliptola, α-pinenoa, eudesmol, limonenoa eta karvona) identifikatu ziren EO eraginkorren konposatu nagusi gisa eta banan-banan probatu ziren Egiptoko Aedes eltxo helduen aurka.Probit-en erregresio-analisiaren arabera, Eudesmol-ek potentzial handiena zuela aurkitu zen 1,82 ppm-ko LC50 balioarekin, eta ondoren Eucalyptol-ek 17,60 ppm-ko LC50 balioarekin 24 orduko esposizio-denboran.Probatu diren gainerako bost konposatuak 140,79 eta 737,01 ppm bitarteko LC50ak dituzten helduentzat kaltegarriak izan dira (3. taula).Malathion organofosforo sintetikoa eudesmol baino indartsuagoa zen eta beste sei konposatuak baino handiagoa izan zen, 24 orduko esposizio-aldian LC50 balioarekin 5,44 ppm (3. taula, 6. taula osagarria).
Zazpi berun-konposatu indartsuak eta organofosforo-tamefosatoa hautatu ziren euren LC50 dosien konbinazio bitarrak 1:1 proportzioan formulatzeko.Guztira 28 konbinazio bitar prestatu eta probatu ziren Aedes aegypti-ren aurkako eraginkortasun larbizidarako.Bederatzi konbinazio sinergikoak zirela aurkitu zen, 14 konbinazio antagonikoak ziren eta bost konbinazio ez ziren larbizida.Konbinazio sinergikoen artean, dialil disulfuroaren eta temofolaren konbinazioa izan zen eraginkorrena, 24 orduren buruan %100eko hilkortasuna ikusi baitzen (4. taula).Era berean, limonenoaren nahasteek dialil disulfuroarekin eta eugenolarekin timetfosarekin potentzial ona erakutsi zuten larben hilkortasuna ikusitako % 98,3ko (5. taula).Gainerako 4 konbinazioek, hots, eudesmol gehi eukaliptola, eudesmol plus limonenoa, eukaliptola gehi alfa-pinenoa, alfa-pinenoa eta temefosa ere, eraginkortasun larbizida nabarmena erakutsi zuten, ikusitako hilkortasun-tasak %90etik gorakoak izan baitziren.Espero den heriotza-tasa %60-75etik gertu dago.(4. taula).Hala ere, limonenoa α-pinenoarekin edo eukaliptoarekin konbinatzeak erreakzio antagonikoak erakutsi zituen.Era berean, Temephos-en nahasteek eugenol edo eukaliptoarekin edo eudesmol edo dialil trisulfuroarekin nahasteek eragin antagonikoak dituztela ikusi da.Era berean, dialil disulfuroaren eta dialil trisulfuroaren konbinazioa eta konposatu hauetakoren bat eudesmolarekin edo eugenolarekin konbinatzea antagonikoak dira beren ekintza larbizidarako.Eudesmol eugenol edo α-pinenoarekin konbinatzean ere antagonismoa jakinarazi da.
Helduen jarduera azidorako probatutako 28 nahaste bitarretatik 7 konbinazio sinergikoak ziren, 6k ez zuten eraginik izan eta 15 antagonikoak ziren.Eudesmol nahasketak eukaliptoarekin eta limonenoa karbonarekin nahasteak beste konbinazio sinergiko batzuk baino eraginkorragoak zirela ikusi zen, 24 orduko heriotza-tasa % 76 eta % 100ekoa izanik, hurrenez hurren (5. taula).Malathion-ek efektu sinergiko bat erakusten duela konposatu konbinazio guztiekin, limonenoa eta dialil trisulfuroa izan ezik.Bestalde, dialil disulfuroaren eta dialil trisulfuroaren eta bietako bat eukaliptoarekin, edo eukaliptolarekin, edo karbonarekin edo limonenoarekin konbinatuta, antagonismoa aurkitu da.Era berean, α-pinenoaren konbinazioak eudesmol edo limonenoarekin, eukaliptol karvona edo limonenoarekin eta limonenoa eudesmol edo malathionarekin efektu larbizida antagonikoak erakutsi zituzten.Gainerako sei konbinazioetan, ez zen alde handirik egon esperotako eta ikusitako hilkortasunaren artean (5. taula).
Efektu sinergikoetan eta dosi subletaletan oinarrituta, Aedes aegypti eltxo kopuru handi baten aurkako duten toxikotasun larbizida aukeratu eta gehiago probatu zen.Emaitzek erakutsi zuten behatutako larben hilkortasuna eugenol-limoneno, dialil disulfuro-limoneno eta dialil disulfuro-timephos konbinazio bitarrak erabiliz % 100ekoa izan zela, eta espero zen larben hilkortasuna % 76,48, % 72,16 eta % 63,4koa, hurrenez hurren (6. taula)..Limonenoaren eta eudesmolaren konbinazioa nahiko eraginkorra izan zen, % 88ko larben hilkortasuna ikusi zen 24 orduko esposizio-aldian (6. taula).Laburbilduz, aukeratutako lau konbinazio bitarrek Aedes aegyptiren aurkako efektu larbizida sinergikoak ere frogatu zituzten eskala handian aplikatzean (6. taula).
Hiru konbinazio sinergiko aukeratu ziren adultozida biosaiakuntzarako, Aedes aegypti helduen populazio handiak kontrolatzeko.Intsektu-kolonia handietan probatzeko konbinazioak hautatzeko, lehenik eta behin bi terpeno-konbinazio sinergiko onenetan zentratu ginen, hots, karvona gehi limonenoa eta eukaliptol gehi eudesmol.Bigarrenik, konbinazio sinergiko onena organofosfato sintetikoen malathion eta terpenoideen konbinaziotik aukeratu zen.Malathion eta eudesmol konbinazioa intsektu kolonia handietan probatzeko konbinaziorik onena dela uste dugu, ikusitako hilkortasun handienagatik eta osagai hautagaien LC50 balio oso baxuengatik.Malathionek sinergismoa erakusten du α-pinenoarekin, dialil disulfuroarekin, eukaliptoarekin, karvonarekin eta eudesmolarekin konbinatuta.Baina LC50 balioei erreparatuz gero, Eudesmol-ek du balio baxuena (2,25 ppm).Malathion, α-pineno, dialil disulfuro, eukaliptol eta karvonearen LC50 balioak 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 eta 140,79 ppm izan ziren.hurrenez hurren.Balio hauek malathion eta eudesmol konbinazioa dosiari dagokionez konbinazio egokiena dela adierazten dute.Emaitzek erakutsi zuten karvona gehi limonenoa eta eudesmol eta malathion konbinazioek ikusitako % 100eko hilkortasuna izan zutela, espero zen % 61 eta % 65 arteko hilkortasunarekin alderatuta.Beste konbinazio batek, eudesmol gehi eukaliptolak, % 78,66ko heriotza-tasa erakutsi zuen 24 orduko esposizioaren ondoren, espero den heriotza-tasa % 60koarekin alderatuta.Aukeratutako hiru konbinazioek efektu sinergikoak erakutsi zituzten, nahiz eta eskala handian aplikatu Aedes aegypti helduen aurka (6. taula).
Ikerketa honetan, hautatutako landare-EOek, hala nola, Mp, As, Os, Em eta Cl bezalako efektu hilgarriak itxaropentsuak erakutsi zituzten Aedes aegypti-ren larba eta helduen faseetan.Mp EOk jarduera larbizidarik handiena izan zuen 0,42 ppm-ko LC50 balioarekin, 24 orduren ondoren As, Os eta Em EOek 50 ppm baino gutxiagoko LC50 balioarekin.Emaitza hauek bat datoz eltxoen eta beste euli diptero batzuen aurreko ikerketekin10,11,12,13,14.Cl-ren potentzia larbizida beste olio esentzialak baino txikiagoa den arren, 24 orduren buruan 163,65 ppm-ko LC50 balioarekin, bere helduen potentziala handiena da 23,37 ppm-ko LC50 balioarekin 24 ordu igaro ondoren.Mp, As eta Em EOek ere potentzial alergiko ona erakutsi zuten LC50 balioekin 100-120 ppm-ko tartean esposizioaren 24 ordutan, baina eraginkortasun larbizida baino nahiko baxuagoak ziren.Bestalde, EO Os-ek efektu alergida arbuiagarria frogatu zuen dosi terapeutiko handienean ere.Hala, emaitzek adierazten dute etileno oxidoak landareentzat duen toxikotasuna eltxoen garapen-fasearen arabera alda daitekeela15.Era berean, intsektuen gorputzean EOak sartzeko abiaduraren, xede-entzima espezifikoekin duten elkarreraginaren eta garapen-fase bakoitzean eltxoaren desintoxikazio-ahalmenaren araberakoa da16.Azterketa ugarik frogatu dute osagaien konposatu nagusia faktore garrantzitsua dela etileno oxidoaren jarduera biologikoan, konposatu guztien gehiengoa osatzen baitu3,12,17,18.Horregatik, EO bakoitzean bi konposatu nagusi hartu ditugu kontuan.GC-MS emaitzetan oinarrituta, dialil disulfuroa eta dialil trisulfuroa EO As-en konposatu nagusi gisa identifikatu ziren, aurreko txostenekin bat datorrena19,20,21.Aurreko txostenek mentola bere konposatu nagusietako bat zela adierazi bazuten ere, karvona eta limonenoa berriro identifikatu ziren Mp EO22,23-ren konposatu nagusi gisa.Os EO-ren konposizio-profilak erakutsi zuen eugenola eta metil eugenola direla konposatu nagusiak, eta hori lehenagoko ikertzaileen aurkikuntzen antzekoa da16,24.Eukaliptola eta eukaliptola Em hosto-olioan dauden konposatu nagusiak direla jakinarazi dute, eta hori bat dator ikertzaile batzuen aurkikuntzekin25,26 baina Olalade et al.27-ren aurkikuntzen aurka.Melaleuca olio esentzialean zineolaren eta α-pinenoaren nagusitasuna ikusi zen, aurreko ikerketen antzekoa dena28,29.Leku ezberdinetan landare-espezie beretik ateratako olio esentzialen konposizio eta kontzentrazio barruko desberdintasunen berri eman da eta ikerketa honetan ere ikusi dira, landareen hazkuntza-baldintze geografikoek, uzta-denborek, garapen-faseek edo landareen adinek eragina dutela.kimiotipoen agerpena, etab.22,30,31,32.Ondoren identifikatutako konposatu gakoak erosi eta probatu zituzten Aedes aegypti eltxo helduengan dituzten efektu larbizidak eta efektuengatik.Emaitzek erakutsi zuten dialil disulfuroaren jarduera larbizida EO As gordinarenaren parekoa zela.Baina dialil trisulfuroaren jarduera EO As baino handiagoa da.Emaitza hauek Kimbaris et al-ek lortutakoen antzekoak dira.33 Culex filipinetan.Hala ere, bi konposatu hauek ez zuten jarduera autozida onik erakutsi xede eltxoen aurka, eta hori bat dator Plata-Rueda et al 34 Tenebrio molitor-en emaitzekin.Os EO eraginkorra da Aedes aegyptiren larba fasearen aurka, baina ez helduen fasearen aurka.Konposatu indibidual nagusien jarduera larbizida Os EO gordinarena baino txikiagoa dela egiaztatu da.Horrek beste konposatu batzuen eta haien elkarrekintzak etileno oxido gordinean eginkizun bat suposatzen du.Metil eugenolak bakarrik jarduera arbuiagarria du, eugenolak bakarrik jarduera larbizida moderatua du.Ondorio honek berresten du, batetik,35,36, eta, bestetik, aurreko ikertzaileen ondorioekin kontraesanean37,38.Eugenol eta metileugenolaren talde funtzionaletan dauden desberdintasunak toxikotasun desberdinak eragin ditzake helburu intsektu berarentzat39.Limonenoak jarduera larbizida moderatua zuela aurkitu zen, eta karvonaren eragina hutsala zen bitartean.Era berean, intsektu helduentzat limonenoak duen toxikotasun nahiko baxuak eta karbonaren toxikotasun handiak aurreko ikerketa batzuen emaitzei onartzen dute40, baina beste batzuekin kontraesanean daude41.Posizio intrazikliko zein exoziklikoetan lotura bikoitzak egoteak konposatu horien onurak areagotu ditzake larbizida gisa3,41, eta karbonak, alfa eta beta karbono asegabeak dituen zetona den bitartean, helduengan toxikotasun potentzial handiagoa izan dezake42.Hala ere, limonenoaren eta karvonaren ezaugarri indibidualak EO Mp osoa baino askoz txikiagoak dira (1. taula, 3. taula).Probatu diren terpenoideen artean, eudesmol-ek aktibitate larbizida eta helduen jarduera handiena duela ikusi da 2,5 ppm-tik beherako LC50 balioarekin, eta Aedes eltxoen kontrolerako konposatu itxaropentsua da.Bere errendimendua EO Em osoarena baino hobea da, nahiz eta hori ez datorren Cheng et al.40-en aurkikuntzekin.Eudesmol bi isopreno unitate dituen sesquiterpenoa da, eukaliptoa bezalako monoterpeno oxigenatuek baino hegazkorragoa dena eta, beraz, pestizida gisa potentzial handiagoa duena.Eukaliptolak berak helduen jarduera larbizida baino handiagoa du, eta lehenagoko ikerketen emaitzek hori onartzen dute eta ezeztatzen dute37,43,44.Jarduera bakarrik EO Cl osoaren ia parekoa da.Beste monoterpeno bizikliko batek, α-pinenoak, helduentzako eragin txikiagoa du Aedes aegypti-n efektu larbizida batek baino, hau da, EO Cl osoaren efektuaren kontrakoa.Terpenoideen intsektizida-jarduera orokorra haien lipofiliak, hegazkortasunak, karbono-adarkatzeek, proiekzio-eremuak, azalerak, talde funtzionalek eta haien posizioek eragiten dute45,46.Konposatu hauek zelula-metaketak suntsituz, arnas-jarduera blokeatu, nerbio-bulkadaren transmisioa eten, etab. 47 Temephos organofosfato sintetikoak jarduera larbizidarik handiena duela aurkitu zen 0,43 ppm-ko LC50 balioarekin, Lek-en datuekin bat datorrena - Utala48.Malathion organofosforiko sintetikoaren helduen jarduera 5,44 ppm-an jakinarazi zen.Bi organofosfato hauek Aedes aegypti-ren laborategiko anduien aurka erantzun onak erakutsi dituzten arren, munduko hainbat tokitan eltxoen erresistentzia konposatu horiei buruzkoa izan da49.Hala ere, ez da aurkitu belar sendagaiekiko erresistentziaren garapenaren antzeko txostenik50.Horrela, botanika pestizida kimikoen alternatiba potentzialtzat hartzen da bektore-kontroleko programetan.
Efektu larbizida thymetphos duten terpenoide eta terpenoide indartsuetatik prestatutako 28 konbinazio bitarretan (1:1) probatu zen, eta 9 konbinazio sinergikoak, 14 antagonikoak eta 5 antagonikoak zirela ikusi zen.Ez dago eraginik.Bestalde, helduen potentziaren biosaiakeran, 7 konbinazio sinergikoak zirela ikusi zen, 15 konbinazio antagonikoak ziren eta 6 konbinaziok ez zutela eraginik izan.Konbinazio batzuek efektu sinergiko bat sorrarazten duten arrazoia konposatu hautagaiek bide garrantzitsu ezberdinetan aldi berean elkarreragiten dutelako edo bide biologiko jakin bateko entzima gako desberdinen inhibizio sekuentzialaren ondoriozkoa izan daiteke51.Limonenoaren konbinazioa dialil disulfuroarekin, eukaliptoarekin edo eugenolarekin sinergikoa zela ikusi zen eskala txikian zein handian aplikazioetan (6. taula), eukaliptoarekin edo α-pinenoarekin konbinatzeak larbetan eragin antagonikoak dituela ikusi zen.Batez beste, limonenoa sinergizatzaile ona dela dirudi, ziurrenik metil taldeen presentziagatik, estratum korneoan sartze onagatik eta beste ekintza-mekanismo batengatik52,53.Aurretik jakinarazi da limonenoak efektu toxikoak sor ditzakeela intsektuen kutikuletan sartuz (kontaktuaren toxikotasuna), digestio-sisteman eraginez (elikagaien aurkakoa) edo arnas aparatuari eraginez (fumigazio-jarduera), 54, fenilpropanoideek, hala nola, eugenola, entzima metabolikoetan eragina izan dezaketela 55. Hori dela eta, ekintza-mekanismo desberdinak dituzten konposatuen konbinazioak nahastearen eragin hilgarri orokorra areagotu dezake.Eukaliptola dialil disulfuroarekin, eukaliptoarekin edo α-pinenoarekin sinergikoa zela aurkitu zen, baina beste konposatu batzuekin beste konbinazio batzuk ez-larbizida edo antagonikoak ziren.Lehen ikerketek erakutsi zuten eukaliptolak azetilkolinesterasaren (AChE) aktibitate inhibitzailea duela, baita oktaamina eta GABA errezeptoreetan ere56.Monoterpeno ziklikoek, eukaliptolak, eugenolak eta abarrek beren jarduera neurotoxikoaren ekintza-mekanismo bera izan dezaketenez 57, eta, horrela, elkarren arteko inhibizioaren bidez haien efektu konbinatuak minimizatuz.Era berean, Temephos dialil disulfuroarekin, α-pinenoarekin eta limonenoarekin konbinatzea sinergikoa zela ikusi zen, belar produktuen eta organofosfato sintetikoen arteko efektu sinergikoaren aurreko txostenak onartzen direla58.
Eudesmol eta eukaliptolaren konbinazioak Aedes aegypti-ren larba eta helduen fasean eragin sinergiko bat duela ikusi zen, ziurrenik egitura kimiko desberdinengatik duten ekintza-modu desberdinengatik.Eudesmol (sesquiterpeno bat) arnas aparatuan eragina izan dezake 59 eta eukaliptolak (monoterpeno bat) azetilkolinesterasan eragina izan dezake 60 .Osagaiak helburu gune bi edo gehiagorekin batera esposizioak konbinazioaren efektu hilgarri orokorra areagotu dezake.Helduentzako substantzia bioensayoetan, malathion-a karvona edo eukaliptol edo eukaliptol edo dialil disulfuroarekin edo α-pinenoarekin sinergikoa dela aurkitu da, limonenoa eta dia gehitzearekin sinergikoa dela adieraziz.Alerzida sinergiko hautagai onak terpeno-konposatuen zorro osorako, alil trisulfuroa izan ezik.Thangam-ek eta Kathiresan61-ek ere belar-estraktuekin malathion-en efektu sinergikoaren antzeko emaitzak eman zituzten.Erantzun sinergiko hau malathion eta fitokimikoen efektu toxiko konbinatuen ondorioz izan daiteke intsektuen detoxifikazio entzimetan.Malathion bezalako organofosfatoek, oro har, P450 zitokromo esterasak eta monooxigenasak inhibituz jokatzen dute62,63,64.Hori dela eta, malathion ekintza-mekanismo hauekin eta terpenoak ekintza-mekanismo ezberdinekin konbinatuz eltxoen efektu hilgarri orokorra areagotu daiteke.
Bestalde, antagonismoak adierazten du aukeratutako konposatuak konbinatuta konposatu bakoitza bakarrik baino aktibo gutxiago direla.Konbinazio batzuetan antagonismoaren arrazoia izan daiteke konposatu batek beste konposatuaren portaera aldatzen duela xurgapen, banaketa, metabolismo edo iraizketa-tasa aldatuz.Lehen ikertzaileek uste zuten hori droga-konbinazioetan antagonismoaren kausa zela.Molekulak Mekanismo posiblea 65. Era berean, antagonismoaren kausa posibleak antzeko ekintza-mekanismoekin, konposatu osagaien lehiarekin erlazionatu daitezke hartzaile edo helburu-gune berarekin.Zenbait kasutan, xede-proteinaren inhibizio ez-lehiakorra ere gerta daiteke.Azterketa honetan, bi organosulfuro-konposatuek, dialil disulfuroa eta dialil trisulfuroa, efektu antagonikoak erakutsi zituzten, beharbada helburu gune beraren lehiaren ondorioz.Era berean, bi sufre-konposatu hauek efektu antagonikoak erakutsi zituzten eta ez zuten eraginik izan eudesmol eta α-pinenoarekin konbinatuta.Eudesmol eta alfa-pinenoa izaera ziklikoak dira, dialil disulfuroa eta dialil trisulfuroa, berriz, izaera alifatikoa.Egitura kimikoan oinarrituta, konposatu hauen konbinazioak jarduera hilgarri orokorra areagotu beharko luke, haien xede-guneak normalean desberdinak direlako34,47, baina esperimentalki antagonismoa aurkitu dugu, eta konposatu hauek in vivo organismo ezezagun batzuetan duten eginkizunagatik izan daiteke.interakzioaren ondorioz sistemak.Era berean, zineolaren eta α-pinenoaren konbinazioak erantzun antagonikoak sortu zituen, nahiz eta ikertzaileek aurretik bi konposatuek ekintza-helburu desberdinak dituztela jakinarazi zuten47,60.Bi konposatuak monoterpeno ziklikoak direnez, lotzeko lehian lehiatu eta aztertutako bikote konbinatzaileen toxikotasun orokorra eragin dezaketen helburu-gune komun batzuk egon daitezke.
LC50 balioen eta ikusitako hilkortasunaren arabera, bi terpeno-konbinazio sinergiko onenak aukeratu ziren, hots, karvona + limonenoa eta eukaliptol + eudesmol bikoteak, baita terpenodun organofosforoso malation sintetikoa ere.Malathion + Eudesmol konposatuen konbinazio sinergiko optimoa helduen intsektizida biosaiakuntza batean probatu zen.Helburua intsektu-kolonia handiei zuzenduta, konbinazio eraginkor hauek esposizio-espazio handi samarretan banako kopuru handien aurka funtziona dezaketen baieztatzeko.Konbinazio hauek guztiek efektu sinergikoa erakusten dute intsektu multzo handien aurka.Antzeko emaitzak lortu ziren Aedes aegypti larben populazio handien aurka probatutako konbinazio larbizida sinergiko optimo baterako.Beraz, esan daiteke landareen EO konposatuen konbinazio larbizida eta adultizida sinergiko eraginkorra hautagai sendoa dela lehendik dauden produktu kimiko sintetikoen aurka eta gehiago erabil daitekeela Aedes aegypti populazioak kontrolatzeko.Era berean, terpenoekin larbizida sintetikoen edo adultizidaren konbinazio eraginkorrak ere erabil daitezke eltxoei ematen zaizkien thymetphos edo malathion dosiak murrizteko.Konbinazio sinergiko indartsu hauek Aedes eltxoen botiken erresistentziaren bilakaerari buruzko etorkizuneko ikerketetarako irtenbideak eman ditzakete.
Aedes aegypti-ren arrautzak Eskualdeko Medikuntza Ikerketa Zentroan, Dibrugarh, Indiako Ikerketa Medikoen Kontseiluan bildu ziren eta tenperatura kontrolatuan (28 ± 1 °C) eta hezetasunean (% 85 ± 5) mantendu ziren, Gauhati Unibertsitateko Zoologia Sailean. baldintza hauek: Arivoli deskribatu ziren et al.Eklosioaren ondoren, larbei larben janaria elikatzen zitzaien (txakurren gaileta hautsa eta legamia 3:1 proportzioan) eta helduei %10eko glukosa-soluzio batez elikatu zitzaien.Sortu ondorengo 3. egunean hasita, eltxo eme helduei arratoi albinoen odola zurrupatzen utzi zieten.Jarri iragazki-papera uretan edalontzi batean eta jarri arrautzak erruteko kaiolan.
Aukeratutako landare-laginak, hots, eukalipto hostoak (Myrtaceae), albahaka santua (Lamiaceae), menda (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) eta allium erraboilak (Amaryllidaceae).Guwahatitik bildua eta Gauhati Unibertsitateko Botanika Sailak identifikatua.Bildutako landare-laginak (500 g) Clevenger aparatuarekin hidrodestilaziora eraman zituzten 6 orduz.Erauzitako EO beirazko ontzi garbietan bildu eta 4 °C-tan gorde zen gehiago aztertzeko.
Toxikotasun larbizida Osasunaren Mundu Erakundearen prozedura estandarrak apur bat aldatuta 67 erabiliz aztertu zen.Erabili DMSO emultsionatzaile gisa.EO kontzentrazio bakoitza 100 eta 1000 ppm-tan probatu zen hasieran, erreplika bakoitzean 20 larba agerian utziz.Emaitzetan oinarrituta, kontzentrazio-tartea aplikatu zen eta hilkortasuna ordu 1etik 6 ordura (ordu 1eko tarteetan) erregistratu zen eta tratamenduaren ondoren 24 ordu, 48 eta 72 ordura.Kontzentrazio subletalak (LC50) 24, 48 eta 72 orduko esposizioaren ondoren zehaztu ziren.Kontzentrazio bakoitza hiru aldiz probatu zen kontrol negatibo batekin (ura soilik) eta kontrol positibo batekin (DMSOz tratatutako ura).Pupazioa gertatzen bada eta kontrol taldeko larben % 10 baino gehiago hiltzen bada, esperimentua errepikatzen da.Kontrol-taldean hilkortasun-tasa % 5-10 artekoa bada, erabili Abbott zuzenketa formula 68.
Ramar et al-ek deskribatutako metodoa.69 helduen biosaiakuntzarako erabili zen Aedes aegyptiren aurkako azetona disolbatzaile gisa erabiliz.EO bakoitza Aedes aegypti eltxo helduen aurka probatu zen hasieran, 100 eta 1000 ppm-ko kontzentrazioetan.Aplikatu prestatutako disoluzio bakoitzeko 2 ml Whatman zenbakiari.1 iragazki paper zati (12 x 15 cm2) eta utzi azetona 10 minutuz lurruntzen.Kontrol gisa 2 ml azetonarekin tratatutako iragazki-papera erabili zen.Azetona lurrundu ondoren, tratatutako iragazki-papera eta kontrol-iragazki-papera hodi zilindriko batean (10 cm-ko sakonera) jartzen dira.3 eta 4 eguneko hamar eltxo odol elikatzen ez ziren kontzentrazio bakoitzeko hirukoiztuetara transferitu ziren.Aurretiazko proben emaitzen arabera, hautatutako olioen hainbat kontzentrazio probatu ziren.Hilkortasuna eltxoa askatu eta 1 ordu, 2 ordu, 3 ordu, 4 ordu, 5 ordu, 6 ordu, 24 ordu, 48 ordu eta 72 ordura erregistratu zen.Kalkulatu LC50 balioak 24 ordu, 48 ordu eta 72 orduko esposizio-denboretarako.Kontrol-lotearen hilkortasun-tasa % 20tik gorakoa bada, errepikatu proba osoa.Era berean, kontrol-taldean hilkortasun-tasa % 5 baino handiagoa bada, egokitu tratatutako laginen emaitzak Abbotten formula erabiliz68.
Gas-kromatografia (Agilent 7890A) eta masa-espektrometria (Accu TOF GCv, Jeol) egin ziren hautatutako olio esentzialen konposatuak aztertzeko.GC FID detektagailu bat eta zutabe kapilar bat (HP5-MS) hornituta zegoen.Gas eramailea helioa zen, emaria 1 ml/min.GC programak Allium sativum 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M-ra ezartzen du eta Ocimum Sainttum 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280. mendarako 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280rako, eukaliptorako 20,60-1M-10-200-3M-30-280rako, eta gorrirako Mila geruzetarako horiek dira. 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
EO bakoitzeko konposatu nagusiak identifikatu ziren GC kromatogramaren eta masa-espektrometriaren emaitzetatik (NIST 70 estandar datu-baseari erreferentzia eginda) kalkulatutako eremuaren ehunekoaren arabera.
EO bakoitzeko bi konposatu nagusiak GC-MS emaitzetan oinarrituta aukeratu ziren eta Sigma-Aldrich-i erosi ziren % 98-99ko purutasunean biosaio gehiago egiteko.Konposatuak Aedes aegypti-ren aurka larbizida eta helduen eraginkortasuna probatu ziren goian azaldu bezala.Gehien erabiltzen diren larbizida sintetikoak tamefosatoa (Sigma Aldrich) eta droga helduen malathion (Sigma Aldrich) aztertu ziren, haien eraginkortasuna hautatutako EO konposatuekin alderatzeko, prozedura bera jarraituz.
Hautatutako terpeno-konposatuen eta terpeno-konposatuen eta organofosfato komertzialen (tilephos eta malathion) nahasketa bitarrak prestatu ziren konposatu hautagai bakoitzaren LC50 dosia 1:1 proportzioan nahastuz.Prestatutako konbinazioak Aedes aegyptiren larba eta helduen faseetan probatu ziren goian deskribatu bezala.Biosaio bakoitza hiru aldiz egin zen konbinazio bakoitzerako eta hirukoiztuta konbinazio bakoitzean dauden konposatu indibidualentzat.Helburuko intsektuen heriotza 24 orduren buruan erregistratu zen.Kalkulatu nahaste bitar baten espero den hilkortasun-tasa hurrengo formula erabiliz.
non E = Aedes aegypti eltxoen hilkortasun-tasa espero den konbinazio bitar bati erantzunez, hau da, konexioa (A + B).
Nahaste bitar bakoitzaren efektua sinergiko, antagoniko edo efekturik gabeko gisa etiketatu zen, Pavla52-k deskribatutako metodoaren arabera kalkulatutako χ2 balioaren arabera.Kalkulatu konbinazio bakoitzaren χ2 balioa honako formula hau erabiliz.
Konbinazio baten efektua sinergiko gisa definitu zen, kalkulatutako χ2 balioa dagozkion askatasun-graduen taulako balioa baino handiagoa denean (% 95eko konfiantza-tartea) eta ikusitako hilkortasuna espero den hilkortasuna gainditzen zuela aurkitzen bazen.Era berean, edozein konbinaziotarako kalkulatutako χ2 balioak taulako balioa gainditzen badu askatasun maila batzuekin, baina ikusitako hilkortasuna espero den hilkortasuna baino txikiagoa bada, tratamendua antagonikotzat hartzen da.Eta edozein konbinaziotan χ2-ren kalkulatutako balioa dagozkion askatasun-graduetan taulako balioa baino txikiagoa bada, konbinazioak ez duela eraginik izango kontsideratzen da.
Hiruzpalau konbinazio sinergiko potentzial (100 larba eta 50 intsektu larbizida eta helduen jarduera) aukeratu ziren intsektu kopuru handi baten aurka probatzeko.Helduak) goian bezala jarraitu.Nahasteekin batera, hautatutako nahasteetan dauden konposatu indibidualak ere probatu ziren Aedes aegypti larba eta heldu kopuru berdinetan.Konbinazio-erlazioa konposatu hautagai baten LC50 dosi zati bat eta beste konposatu osagai baten LC50 dosi zati bat da.Helduen jardueraren biosaiakeran, hautatutako konposatuak disolbatzaile azetonan disolbatu ziren eta 1300 cm3-ko plastikozko ontzi zilindriko batean bildutako iragazki-paperean aplikatu ziren.Azetona 10 minutuz lurrundu eta helduak askatu ziren.Era berean, biosaiakuntza larbizidan, LC50 konposatu hautagaien dosiak lehenik DMSO bolumen berdinetan disolbatu ziren eta gero 1300 cc-ko plastikozko ontzietan gordetako litro urarekin nahastu ziren, eta larbak askatu zituzten.
Grabatutako 71 hilkortasun datuen analisi probabilista SPSS (16 bertsioa) eta Minitab softwarea erabiliz egin da LC50 balioak kalkulatzeko.
Argitalpenaren ordua: 2024-07-01