Benin hegoaldeko Khowe-n (etxola-oinarritutako proba pilotu batzuk egin ziren, hurrengo belaunaldiko eltxo-sare berrien eta landa-probatuen eraginkortasun biologikoa ebaluatzeko, piretrina-erresistenteak diren malaria-bektoreen aurka. Landa-sare zaharrak etxeetatik kendu ziren 12, 24 eta 36 hilabete igaro ondoren. ITN osoetatik moztutako sare-zatiak aztertu ziren konposizio kimikoa zehazteko, eta suszeptibilitate-bioanalisiak egin ziren proba bakoitzean, Khowe bektoreen populazioan intsektiziden erresistentzian izandako aldaketak ebaluatzeko.
Interceptor® G2-k beste ITN batzuk gainditu zituen, piretroide eta klorfenapir sareen nagusitasuna beste sare mota batzuekin alderatuta berretsiz. Produktu berrien artean, hurrengo belaunaldiko ITN guztiek Interceptor®-ek baino bioeraginkortasun hobea erakutsi zuten; hala ere, hobekuntza horren magnitudea murriztu egin zen landa-zahartzearen ondoren, piretroideak ez diren konposatuen iraunkortasun laburragoa zelako. Emaitza hauek hurrengo belaunaldiko ITNen intsektizida-iraunkortasuna hobetzeko beharra azpimarratzen dute.
IntsektizidaEltxo-sare tratatuek (ITN) funtsezko zeregina izan dute azken 20 urteotan malariazko morbiditatea eta hilkortasuna murrizteko. 2004az geroztik, 3.000 milioi ITN baino gehiago banatu dira mundu osoan, eta modelizazio-azterketek iradokitzen dute Saharaz hegoaldeko Afrikako malaria kasuen % 68 saihestu zirela 2000 eta 2015 artean. Zoritxarrez, malaria bektoreen populazioen piretroideekiko (ITNetan erabiltzen diren intsektizida mota estandarra) erresistentzia nabarmen handitu da, eta horrek esku-hartze funtsezko honen eraginkortasuna arriskuan jarri du. Aldi berean, malariaren kontrolaren aurrerapena moteldu egin da mundu mailan, eta zama handiko hainbat herrialdek malaria kasuen igoera izan dute 2015az geroztik. Joera horiek ITN produktu berritzaileen belaunaldi berri baten garapena bultzatu dute, piretroideen erresistentziaren mehatxuari aurre egiteko eta zama hori murrizten eta helburu global handinahiak lortzen laguntzeko helburuarekin.
Gaur egun, hiru belaunaldi berriko ITN daude merkatuan, bakoitzak piretroide bat beste intsektizida edo sinergista batekin konbinatzen duena, malaria bektoreen piretroideen erresistentzia gainditzeko gai dena. Azken urteotan, hainbat ausazko kontrolatutako entsegu kliniko (ECA) egin dira sare hauen eraginkortasun epidemiologikoa ebaluatzeko, piretroide soilik duten sare estandarrekin alderatuta, eta Osasunaren Mundu Erakundearen (OME) gomendioak babesteko beharrezko ebidentzia emateko. Piretroideak piperonil butoxidoarekin (PBO) konbinatzen dituzten ohe-sareak izan ziren OMEk gomendatutako lehenak, Tanzanian eta Ugandan egindako ausazko kontrolatutako entsegu klinikoetan piretroide soilik duten ohe-sareekin alderatuta eragin epidemiologiko handiagoa erakutsi ondoren. Hala ere, datu gehiago behar dira Mendebaldeko Afrikan piretroide-PBO ohe-sareen osasun publikoko balioa zehazteko, non piretroideen erresistentzia larriak haien onurak murriztu ditzakeen piretroide soilik duten ohe-sareekin alderatuta.
ITNen intsektizida-iraunkortasuna normalean ebaluatzen da aldian-aldian sareak komunitateetatik bilduz eta laborategiko bioanalisietan probatuz, intsektuetan hazitako eltxo-anduiak erabiliz. Analisi hauek erabilgarriak diren arren intsektiziden bioerabilgarritasuna eta eraginkortasuna denboran zehar sare-gainazalean karakterizatzeko, informazio mugatua ematen dute hurrengo belaunaldiko sare mota desberdinen eraginkortasun konparatiboari buruz, erabilitako metodoak eta eltxo-anduiak dituzten intsektiziden ekintza-modura egokitu behar baitira. Txabola-proba esperimentala beste ikuspegi bat da, intsektizidaz tratatutako sareen eraginkortasuna konparatiboan ebaluatzeko erabil daitekeena iraunkortasun-azterketetan, eltxo basatien ostalarien eta etxeko sareen arteko elkarrekintza naturalak imitatzen dituzten baldintzetan, erabileran zehar. Izan ere, datu epidemiologikoetarako ordezko entomologikoak erabiliz egindako modelizazio-azterketek erakutsi dute entsegu hauetan neurtutako eltxoen hilkortasuna eta elikadura-tasak erabil daitezkeela ITNek malariaren intzidentzian eta prebalentzian duten eragina aurreikusteko, EKA multzoetan. Horrela, txabolan oinarritutako entsegu esperimentalek, non intsektizidaz tratatutako gongoil linfatikoak EKA multzoetan sartzen diren, datu baliotsuak eman ditzakete intsektizidaz tratatutako gongoil linfatikoen bioeraginkortasun konparatiboari eta intsektizida-iraunkortasunari buruz haien bizitza espero den bitartean, eta ikerketa horien emaitza epidemiologikoak interpretatzen lagun dezakete.
Txabola esperimentalaren proba Osasunaren Mundu Erakundeak intsektizidaz tratatutako eltxo-sareen eraginkortasuna ebaluatzeko gomendatutako giza bizileku simulatu estandarizatua da. Proba hauek eltxo-ostalariek etxeko ohe-sareekin elkarreraginean daudenean jasaten dituzten benetako esposizio-baldintzak imitatzen dituzte eta, beraz, oso ikuspegi egokia dira erabilitako ohe-sareen eraginkortasun biologikoa haien bizitza erabilgarrian zehar ebaluatzeko.
Ikerketa honek hiru belaunaldi berriko intsektizida eltxo-sare mota desberdinen (PermaNet® 3.0, Royal Guard® eta Interceptor® G2) eraginkortasun entomologikoa ebaluatu zuen ukuilu esperimentaletan, eta piretrinaz soilik egindako sare estandar batekin (Interceptor®) alderatu zituen. Intsektizidaz tratatutako eltxo-sare horiek guztiak OMEren bektoreen kontrolerako aurrekalifikatutako zerrendan sartuta daude. Eltxo-sare bakoitzaren ezaugarri zehatzak behean ematen dira:
2020ko martxoan, eltxo-sareen banaketa kanpaina handi bat egin zen Zou prefekturako, Benin hegoaldean, txaboletan proba pilotuak egiteko. Interceptor®, Royal Guard® eta Interceptor® G2 ohe-sareak hautatu ziren Kove, Zagnanado eta Ouinhi udalerrietako ausaz hautatutako multzoetatik, intsektizida bikoitzez tratatutako ohe-sareen eraginkortasun epidemiologikoa ebaluatzeko multzo-kontrolatu aleatorio baten barruan. PermaNet® 3.0 eltxo-sareak bildu ziren Avokanzun herrian, Jija eta Bohicon udalerrien ondoan (7°20′ N, 1°56′ E), eta aldi berean banatu ziren RCT multzoko eltxo-sareekin batera Malaria Kontrolatzeko Programa Nazionalaren 2020ko kanpaina masiboan. 1. irudiak ITN mota desberdinak bildu ziren ikerketa-multzoen/herrien kokapenak erakusten ditu, txabolen gune esperimentalekin alderatuta.
Etxola-proba pilotu bat egin zen Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® eta Interceptor® G2 ITN-en errendimendu entomologikoa alderatzeko, etxeetatik zabaldu eta 12, 24 eta 36 hilabetera kendu zirenean. Urteko denbora-puntu bakoitzean, eremuan zahartutako ITN-en errendimendua mota bakoitzeko sare berri eta erabili gabeekin eta kontrol negatibo gisa tratatu gabeko sareekin alderatu zen. Urteko denbora-puntu bakoitzean, eremuan zahartutako ITN-en 54 lagin errepikatu eta mota bakoitzeko 6 ITN berri probatu ziren etxola-proba errepikatu 1 edo 2tan, tratamenduen eguneroko txandakatzean. Etxola-proba bakoitzaren aurretik, ITN mota bakoitzeko sare zaharren batez besteko porositate-indizea neurtu zen OMEren gomendioen arabera. Eguneroko erabileraren higadura simulatzeko, ITN berri eta tratatu gabeko kontrol-sare guztiak sei 4 x 4 cm-ko zulorekin zulatu ziren: bi albo luzeko panel bakoitzean eta bat albo laburreko panel bakoitzean, OMEren gomendioen arabera. Eltxo-sarea txabolan instalatu zen, teilatu-orriak sokekin txabola-hormen goiko izkinetako iltzeetara lotuz. Honako tratamendu hauek ebaluatu ziren txabola-proba bakoitzean:
Sare zahartuak esperimentu-etxoletan ebaluatu ziren sareak kendu ziren urte berean. Etxoletako probak leku berean egin ziren 2021eko maiatzetik irailera, 2022ko apiriletik ekainera eta 2023ko maiatzetik uztailera, sareak 12, 24 eta 36 hilabete igaro ondoren kenduz, hurrenez hurren. Proba bakoitzak tratamendu-ziklo oso bat iraun zuen (9 astetan 54 gau), 12 hilabete izan ezik, non bi tratamendu-ziklo jarraian egin ziren eltxoen laginaren tamaina handitzeko. Karratu latindar diseinu bat jarraituz, tratamenduak astero txandakatu ziren esperimentu-etxolen artean txabolen kokapen-efektuak kontrolatzeko, eta boluntarioak egunero txandakatu ziren ostalari bakoitzaren eltxoen erakargarritasunean zeuden desberdintasunak kontrolatzeko. Eltxoak astean 6 egunez bildu ziren; 7. egunean, hurrengo errotazio-zikloaren aurretik, txabolak garbitu eta aireztatu ziren infestazioa saihesteko.
Anopheles gambiae eltxo erresistenteen aurkako txabola-tratamendu esperimentalaren eta hurrengo belaunaldiko ITNaren eta piretroide-soilik duen Interceptor® sarearen arteko konparaketaren eraginkortasun-puntu nagusiak hauek izan ziren:
Anopheles gambiae eltxo piretroideekiko erresistenteak direnen aurkako txabola-tratamendu esperimentalaren bigarren mailako eraginkortasun-puntuak hauek izan ziren:
Edukitzea (%) – tratatu gabeko taldean sartzeko tasaren murrizketa. Kalkulua honako hau da:
non Tu tratatu gabeko kontrol-taldean sartutako eltxoen kopurua den, eta Tt tratatutako taldean sartutako eltxoen kopurua.
Eltxoen irabiaketa-tasa (%) – Tratamenduak sor dezakeen narritaduragatik sortutako eltxoen irabiaketa-tasa, balkoian bildutako eltxoen proportzio gisa adierazita.
. Odol-xurgatzailearen ezabatze-koefizientea (%) tratatu gabeko taldean odol-xurgatzaileen eltxoen proportzioaren murrizketa da, tratatu gabeko kontrol-taldearekin alderatuta. Kalkulu-metodoa honako hau da: non Bfu tratatu gabeko kontrol-taldeko odol-xurgatzaileen eltxoen proportzioa den, eta Bft tratatu gabeko taldeko odol-xurgatzaileen eltxoen proportzioa.
Ugalkortasunaren murrizketa (%) — tratatu gabeko taldeko eltxo emankorren proportzioaren murrizketa, kontrol-taldearekin alderatuta. Kalkulu-metodoa honako hau da: non Fu tratatu gabeko kontrol-taldeko eltxo emankorren proportzioa den, eta Ft tratatu gabeko taldeko eltxo emankorren proportzioa.
Covè bektoreen populazioen erresistentzia-profilaren aldaketak denboran zehar kontrolatzeko, OMEk in vitro eta fialeko bioanalisiak egin zituen txabola esperimental bakoitzaren urte berean (2021, 2022, 2023), aztertutako ITNetan AIarekiko sentikortasuna ebaluatzeko eta emaitzen interpretazioa informatzeko. In vitro ikerketetan, eltxoak alfa-zipermetrina (% 0,05) eta deltametrina (% 0,05) kontzentrazio zehaztuekin tratatutako iragazki-paperetan jarri ziren, eta CFP (100 μg/botila) eta PPF (100 μg/botila) kontzentrazio zehaztuekin estalitako botiletan, intsektizida horien aurrean sentikortasuna ebaluatzeko. Piretroideen erresistentziaren intentsitatea ikertu zen eltxoak α-zipermetrina eta deltametrina kontzentrazio 5 aldiz (% 0,25) eta 10 aldiz (% 0,50) desberdinetan jarriz. Azkenik, PBO sinergiak eta zitokromo P450 monooxigenasak (P450) gehiegizko adierazpenak piretroideen erresistentzian duten ekarpena ebaluatu zen, eltxoak α-zipermetrina (% 0,05) eta deltametrina (% 0,05) kontzentrazio desberdinetara aldez aurretik esposizioan jarriz eta PBOri (% 4) aldez aurretik esposizioan jarriz. OMEren hodi-probarako erabilitako iragazki-papera Universiti Sains Malaysia-tik erosi zen. CFP eta PPF erabiliz OMEren bioanalisi-probetarako ontziak OMEren gomendioen arabera prestatu ziren.
Bioanalisietarako erabilitako eltxoak larba-fasean bildu ziren esperimentu-etxolen ondoko ugalketa-guneetatik, eta gero heldu bihurtu arte hazi ziren. Denbora-puntu bakoitzean, gutxienez 100 eltxo jarri ziren tratamendu bakoitzean 60 minutuz, hodi/botila bakoitzeko 4 errepikapen eta hodi/botila bakoitzeko 25 eltxo inguru. Piretroide eta CFP esposizioetarako, 3-5 eguneko eltxo elikatu gabeak erabili ziren, eta PPFrako, berriz, 5-7 eguneko odol-xurgatzaileak erabili ziren oogenesia estimulatzeko eta PPFk eltxoen ugalketan duen eragina ebaluatzeko. Esposizio paraleloak egin ziren silikona-olioz bustitako iragazki-papera, PBO purua (% 4) eta azetonaz estalitako botilak kontrol gisa erabiliz. Esposizioaren amaieran, eltxoak tratatu gabeko ontzietara eraman eta % 10eko (p/v) glukosa-soluzioan bustitako kotoi-artilean jarri ziren. Hilkortasuna erregistratu zen piretroideen esposizioaren 24 ordura, eta 24 orduro CFP eta PPFren esposizioaren 72 orduz. PPFrekiko sentikortasuna ebaluatzeko, PPFri esposizioa izan zuten eltxo bizirik iraun zutenak eta dagokien kontrol negatiboak disekzionatu ziren, hilkortasun atzeratua erregistratu ondoren, obulutegien garapena mikroskopio konposatu bat erabiliz behatu zen eta emankortasuna arrautzen garapenaren Christophers fasearen arabera ebaluatu zen [28, 30]. Arrautzak Christophers V faseraino guztiz garatu baziren, eltxoak emankortzat sailkatu ziren, eta arrautzak guztiz garatu ez eta I-IV faseetan geratzen baziren, antzutzat sailkatu ziren.
Urteko une bakoitzean, 30 × 30 cm-ko zatiak moztu ziren sare berrietatik eta sare zaharretatik, OMEren gomendioetan zehaztutako lekuetan [22]. Moztu ondoren, sareak etiketatu, aluminiozko paperean bildu eta hozkailuan gorde ziren 4 ± 2 °C-tan, IA ehunera migratzea saihesteko. Ondoren, sareak Belgikako Valoniako Nekazaritza Ikerketa Zentrora bidali ziren analisi kimikoa egiteko, bizitza erabilgarrian zehar IA eduki osoan izandako aldaketak neurtzeko. Erabilitako analisi-metodoak (Pestiziden Analisirako Nazioarteko Lankidetza Batzordeak gomendatutako metodoetan oinarrituta) aurretik deskribatu dira [25, 31].
Etxola esperimentalen datuetarako, txabola-konpartimentu desberdinetan bizirik/hildako, hozka egiten duten/ez-hozka egiten duten eta ugalkor/esterilen kopuru osoa batu zen entsegu bakoitzeko tratamendu bakoitzerako, emaitza proportzionalak (72 orduko hilkortasuna, hozka egitea, ektoparasitismoa, sarearen harrapaketa, ugalkortasuna) eta dagokien % 95eko konfiantza-tarteak (CI) kalkulatzeko. Emaitza bitar proportzional horietarako tratamenduen arteko desberdintasunak erregresio logistikoa erabiliz aztertu ziren, eta zenbaketa-emaitzen desberdintasunak, berriz, erregresio binomial negatiboa erabiliz. Bi tratamendu-txandakatze ziklo egin zirenez 12 hilabetero eta tratamendu batzuk entseguetan zehar probatu zirenez, eltxoen sartze-analisiak tratamendu bakoitza probatu zen egun kopuruaren arabera egokitu ziren. Emaitza bakoitzerako ITN berria ere aztertu zen denbora-puntu guztietarako estimazio bakarra lortzeko. Tratamenduaren azalpen-aldagai nagusiaz gain, eredu bakoitzak txabola, lo egiten duen pertsona, entsegu-aldia, ITN irekiera-indizea eta eguna sartu zituen efektu finko gisa, lo egiten duen pertsona indibidualaren eta txabola-erakargarritasunaren, sasoikotasunaren, eltxo-sarearen egoeraren eta gehiegizko sakabanaketaren arteko desberdintasunen ondoriozko aldakuntzak kontrolatzeko. Erregresio-analisiek doitutako odds ratioak (OR) eta dagokien % 95eko konfiantza-tarteak sortu zituzten, belaunaldi berriko ITN-ak Interceptor® piretroide-sarearekin alderatuta eltxoen hilkortasunean eta ugalkortasunean duen eragina kalkulatzeko. Ereduetako P balioak ere erabili ziren lehen eta bigarren mailako emaitzen bikoteka alderatzeko % 5eko mailan esangura estatistikoa adierazten duten letra trinkoak esleitzeko. Erregresio-analisi guztiak Stata 18 bertsioan egin ziren.
Covese bektoreen populazioen suszeptibilitatea in vitro eta botila bioanalisietan behatutako hilkortasun eta ugalkortasunean oinarrituta interpretatu zen, Osasunaren Mundu Erakundearen gomendioen arabera. Analisi kimikoen emaitzek ITN zatietan zegoen AI eduki osoa eman zuten, eta hori erabili zen sare zaharretan, sare berriekin alderatuta, urtero une bakoitzean. Datu guztiak eskuz erregistratu ziren formulario estandarizatuetan eta gero Microsoft Excel datu-base batean sartu ziren bi aldiz.
Benin Osasun Ministerioko (6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA zk.), Londresko Higiene eta Medikuntza Tropikaleko Eskolako (LSHTM) (16237 zk.) eta Osasunaren Mundu Erakundeko (ERC.0003153 zk.) Etika Batzordeek boluntarioekin egindako etxola-proba pilotu bat egitea onartu zuten. Boluntario guztien idatzizko baimen informatua lortu zen ikerketan parte hartu aurretik. Boluntario guztiek doako kimioprofilaxia jaso zuten malariaren arriskua murrizteko, eta erizain bat egon zen entsegu osoan zehar sukar sintomak edo proba-produktuarekiko erreakzio kaltegarriak zituen boluntario oro ebaluatzeko.
Esperimentu-etxolen emaitza osoak, talde esperimental bakoitzerako bizirik/hildako, gosez/odolarekin elikatutako eta ugalkor/esterilen kopuru osoa laburbiltzen dutenak, baita estatistika deskribatzaileak ere, material osagarri gisa aurkezten dira (S1 taula).
Benin-eko Kowa-ko txabola esperimental batean, Anopheles gambiae eltxo piretroideekiko erresistenteak zirenen odol-elikadura kendu zen. Tratatu gabeko kontrolen eta sare berrien datuak entseguetan zehar batu ziren eraginkortasun-estimazio bakarra lortzeko. Erregresio logistikoaren analisi bidez, letra komunak zituzten zutabeak ez ziren nabarmen desberdinak % 5eko mailan (p > 0,05). Errore-barrek % 95eko konfiantza-tarteak adierazten dituzte.
Benin-eko Kowa-ko txabola esperimental batera sartzen diren Anopheles gambiae eltxo basati piretroideekiko erresistenteen hilkortasuna. Tratatu gabeko kontrolen eta sare berrien datuak entseguetan zehar batu ziren eraginkortasunaren estimazio bakarra emateko. Erregresio logistikoaren analisi bidez, letra komunak zituzten zutabeak ez ziren nabarmen desberdinak % 5eko mailan (p > 0,05). Errore-barrek % 95eko konfiantza-tarteak adierazten dituzte.
Odds ratioak eltxo-sare belaunaldi berrien eta piretroide soilik dituztenen arteko hilkortasun-aldea deskribatzen du. Lerro puntuatuak 1eko odds ratioa adierazten du, eta horrek esan nahi du ez dagoela hilkortasun-alderik. 1etik gorako odds ratio batek hilkortasun handiagoa adierazten du eltxo-sare belaunaldi berriekin. Eltxo-sare belaunaldi berrien datuak entsegu guztietan batu ziren eraginkortasunaren estimazio bakarra lortzeko. Errore-barrek % 95eko konfiantza-tarteak adierazten dituzte.
Interceptor®-ek probatu diren ITN guztien artean hilkortasun txikiena erakutsi duen arren, eremuko zahartzeak ez du eragin negatiborik izan bektoreen hilkortasunean. Izan ere, Interceptor® berriak % 12ko hilkortasuna eragin zuen, eremuko sare zahartuek, berriz, hobekuntza txikia erakutsi zuten 12 hilabetetan (% 17, p = 0,006) eta 24 hilabetetan (% 17, p = 0,004), sare berrien antzeko mailetara itzuli aurretik 36 hilabetetan (% 11, p = 0,05). Aitzitik, intsektizidaz tratatutako sareen hurrengo belaunaldiko hilkortasun-tasak pixkanaka jaitsi ziren denboran zehar zabaldu ondoren. Murrizketa nabarmenena Interceptor® G2-rekin izan zen, non hilkortasuna sare berriekin % 58tik % 36ra jaitsi baitzen 12 hilabetetan (p< 0,001), % 31 24 hilabetetan (p< 0,001), eta % 20 36 hilabetetan (p< 0,001). PermaNet® 3.0 berriak hilkortasuna % 37ra murriztu zuen, eta hori ere nabarmen jaitsi zen % 20ra 12 hilabetetan (p< 0,001), % 16 24 hilabetetan (p< 0,001), eta % 18 36 hilabetetan (p< 0,001). Joera antzekoa ikusi zen Royal Guard®-ekin, sare berriak hilkortasuna % 33 murriztu baitzuen, eta ondoren, 12 hilabetetan, % 21era jaitsi zen nabarmen (p< 0,001), % 17 24 hilabetetan (p< 0,001) eta % 15 36 hilabetetan (p< 0,001).
Benin-eko Kwa-ko txabola esperimental batean sartzen diren Anopheles gambiae eltxo basatien ugalkortasunaren murrizketa. Tratatu gabeko kontrolen eta sare berrien datuak entseguetan zehar batu ziren eraginkortasunaren estimazio bakarra emateko. Letra komunak zituzten barrak ez ziren nabarmen desberdinak izan % 5eko mailan (p > 0,05) erregresio logistikoaren analisi bidez. Errore-barrek % 95eko konfiantza-tarteak adierazten dituzte.
Odds ratioek eltxo-sare berrien eta piretroide-sareen arteko ugalkortasun-aldea deskribatzen dute. Lerro puntudunak 1eko erlazioa adierazten du, ugalkortasunean ez dagoela desberdintasunik adieraziz. Odds ratioak< 1-ek ugalkortasun-murrizketa handiagoa adierazten du belaunaldi berriko sareekin. Belaunaldi berriko eltxo-sareen datuak entseguetan batu ziren eraginkortasunaren estimazio bakarra lortzeko. Errore-barrek % 95eko konfiantza-tarteak adierazten dituzte.
Argitaratze data: 2025eko otsailaren 17a