Leishmaniasi biszerala (VL), Indiako azpikontinentean kala-azar bezala ezagutzen dena, Leishmania protozoo flagelatuak eragindako gaixotasun parasitarioa da, eta hilgarria izan daiteke berehala tratatzen ez bada. Phlebotomus argentipes eulitxoa da VLren bektore baieztatu bakarra Hego-ekialdeko Asian, non barruko ihinztadura hondar-ihinztaduraren (IRS) bidez kontrolatzen den, intsektizida sintetiko bat. VL kontrol programetan DDT erabiltzeak erresistentzia garatzea eragin du eulitxoetan, beraz, DDT alfa-zipermetrina intsektizidak ordezkatu du. Hala ere, alfa-zipermetrinak DDTren antzera jokatzen du, beraz, eulitxoetan erresistentzia arriskua handitzen da intsektizida honen eraginpean errepikatzeak eragindako estresaren pean. Ikerketa honetan, eltxo basatien eta haien F1 ondorengoen suszeptibilitatea ebaluatu dugu CDC botila bioanalisia erabiliz.
Indiako Bihar estatuko Muzaffarpur barrutiko 10 herritan eltxoak bildu genituen. Zortzi herrik potentzia handiko antibiotikoak erabiltzen jarraitu zuten.zipermetrinaBarruko ihinztadurarako, herrixka batek potentzia handiko zipermetrina erabiltzeari utzi zion barruko ihinztadurarako, eta herrixka batek ez zuen inoiz potentzia handiko zipermetrina erabili barruko ihinztadurarako. Bildutako eltxoak aurrez definitutako dosi diagnostiko baten eraginpean jarri ziren denbora jakin batez (3 μg/ml 40 minutuz), eta intsektuen aurkako errepresio-tasa eta hilkortasuna erregistratu ziren esposizioaren 24 ordura.
Eltxo basatien hilketa-tasak % 91,19tik % 99,47ra bitartekoak izan ziren, eta F1 belaunaldienak % 91,70etik % 98,89ra. Esposizioaren ondorengo hogeita lau orduetan, eltxo basatien hilkortasuna % 89,34tik % 98,93ra bitartekoa izan zen, eta F1 belaunaldiarena % 90,16tik % 98,33ra.
Ikerketa honen emaitzek adierazten dute erresistentzia garatu daitekeela P. argentipes-en, eta horrek adierazten du etengabeko jarraipena eta zaintza beharrezkoa dela desagerraraztea lortu ondoren kontrola mantentzeko.
Leishmaniasi biszerala (VL), Indiako azpikontinentean kala-azar bezala ezagutzen dena, Leishmania protozoo flagelatuak eragindako gaixotasun parasitarioa da, eta kutsatutako hare-eulia emeen (Diptera: Myrmecophaga) ziztaden bidez transmititzen da. Hare-eulia da VLren bektore baieztatu bakarra Hego-ekialdeko Asian. India VL ezabatzeko helburua lortzetik gertu dago. Hala ere, desagerrarazi ondoren intzidentzia-tasak baxuak mantentzeko, ezinbestekoa da bektoreen populazioa murriztea transmisio potentziala saihesteko.
Hego-ekialdeko Asian eltxoen kontrola barruko ihinztadura erresidualaren (IRS) bidez lortzen da, intsektizida sintetikoak erabiliz. Zilarrezko hanken atseden-jokabide sekretuak intsektizida kontrolatzeko helburu egokia bihurtzen ditu barruko ihinztadura erresidualaren bidez [1]. Indiako Malaria Kontrolerako Programa Nazionalaren arabera diklorodifeniltrikloroetanoaren (DDT) barruko ihinztadura erresidualak ondorio nabarmenak izan ditu eltxoen populazioak kontrolatzeko eta VL kasuak nabarmen murrizteko [2]. VLren kontrol planifikatu gabe honek Indiako VL Desagerrarazteko Programa bultzatu zuen barruko ihinztadura erresiduala zilarrezko hanken kontrolerako metodo nagusi gisa hartzera. 2005ean, Indiako, Bangladeshko eta Nepalgo gobernuek ulermen memorandum bat sinatu zuten VL 2015erako desagerrarazteko helburuarekin [3]. Desagerrarazteko ahaleginak, bektoreen kontrola eta giza kasuen diagnostiko eta tratamendu azkarra konbinatuz, 2015erako sendotze-fasean sartzea zuten helburu, ondoren 2017ra eta gero 2020ra berrikusi zen helburu bat.[4] Gaixotasun tropikal ahaztuak desagerrarazteko bide-orri global berriak VL 2030erako desagerraraztea barne hartzen du.[5]
India BCVDren desagerrarazteko osteko fasean sartzen den heinean, ezinbestekoa da beta-zipermetrinarekiko erresistentzia esanguratsua ez garatzea ziurtatzea. Erresistentziaren arrazoia da DDTak eta zipermetrinak ekintza-mekanismo bera dutela, hau da, VGSC proteina dute jomugan [21]. Beraz, eulietan erresistentzia garatzeko arriskua handitu egin daiteke zipermetrina oso indartsuaren eraginpean egoteak eragindako estresagatik. Beraz, ezinbestekoa da intsektizida honen aurrean erresistenteak diren euli-populazio potentzialak kontrolatu eta identifikatzea. Testuinguru honetan, ikerketa honen helburua euli basatien sentikortasun-egoera kontrolatzea izan zen, Chaubey et al.-ek zehaztutako dosi diagnostikoak eta esposizio-iraupenak erabiliz. [20] P. argentipes aztertu zuten Bihar-eko (India) Muzaffarpur barrutiko herrixka desberdinetan, zipermetrinarekin tratatutako barruko ihinztadura-sistemak etengabe erabiltzen zituztenak (IPS herrixkak jarraituak). Zipermetrinaz tratatutako barruko ihinztadura-sistemak erabiltzeari utzi zioten herrietako (IPS herrixkak ohiak) eta zipermetrinaz tratatutako barruko ihinztadura-sistemak inoiz erabili ez zituzten herrietako (IPS ez diren herrixkak) P. argentipes basatien sentikortasun-egoera CDC botilako bioanalisia erabiliz alderatu ziren.
Hamar herri hautatu ziren ikerketarako (1. irudia; 1. taula), eta horietatik zortzik piretroide sintetikoen (hipermetrina; hipermetrina jarraituzko herri gisa izendatuak) barrualdean etengabeko ihinztaduraren historia zuten eta azken 3 urteetan VL kasuak izan zituzten (gutxienez kasu bat). Ikerketako gainerako bi herrietatik, beta-zipermetrinaren barrualdean ihinztadurarik ezarri ez zuen herri bat (barrualdean ihinztadurarik ez zuen herria) hautatu zen kontrol herri gisa, eta beta-zipermetrinaren barrualdean tarteka ihinztadura zuen beste herria (barrualdean tarteka ihinztadura egiten zuen herria/lehen barrualdean ihinztadura egiten zuen herria) kontrol herri gisa. Herri horien hautaketa Osasun Sailarekin eta Barrualdean Ihinztaduraren Taldearekin koordinatuta eta Muzaffarpur barrutiko Barrualdean Ihinztaduraren Mikro Ekintza Planaren baliozkotzean oinarritu zen.
Muzaffarpur barrutiko mapa geografikoa, ikerketan sartutako herrien kokapenak erakusten dituena (1–10). Ikerketaren kokapenak: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Mapa QGIS softwarea (3.30.3 bertsioa) eta Open Assessment Shapefile erabiliz prestatu zen.
Esposizio-esperimentuetarako botilak Chaubey et al. [20] eta Denlinger et al. [22] metodoen arabera prestatu ziren. Laburbilduz, 500 ml-ko beirazko botilak prestatu ziren esperimentua baino egun bat lehenago eta botilen barneko horma adierazitako intsektizidarekin estali zen (α-zipermetrinaren dosi diagnostikoa 3 μg/ml zen) intsektizidaren azetona-soluzio bat (2,0 ml) botilen hondoan, paretetan eta tapoian aplikatuz. Botila bakoitza arrabol mekaniko batean lehortu zen 30 minutuz. Denbora horretan, poliki-poliki askatu tapoia azetona lurrundu dadin. 30 minutu lehortu ondoren, kendu tapoia eta biratu botila azetona guztia lurrundu arte. Botilak gau osoan lehortzen utzi ziren irekita. Errepikatutako proba bakoitzerako, kontrol gisa erabilitako botila bat 2,0 ml azetonarekin estali zen. Botila guztiak esperimentuetan zehar berrerabili ziren, Denlinger et al.-ek eta Osasunaren Mundu Erakundeak deskribatutako prozeduraren arabera behar bezala garbitu ondoren [22, 23].
Intsektizida prestatu eta hurrengo egunean, 30-40 eltxo basati (eme gosez hilak) kaioletatik atera ziren ontzietan zeuden kaioletatik eta astiro-astiro putz egin zen ontzi bakoitzean. Gutxi gorabehera euli kopuru bera erabili zen intsektizidaz estalitako botila bakoitzeko, kontrola barne. Errepikatu hau gutxienez bost edo sei aldiz herri bakoitzean. Intsektizidaren eraginpean 40 minutu igaro ondoren, lurrera botatako euli kopurua erregistratu zen. Euli guztiak xurgagailu mekaniko batekin harrapatu ziren, sare finez estalitako kartoizko ontzietan jarri ziren, eta inkubagailu bereizi batean jarri ziren hezetasun eta tenperatura baldintza berdinetan, tratatu gabeko koloniekin janari-iturri berarekin (% 30eko azukre-disoluzioan bustitako kotoi-bolatxoak). Hilkortasuna erregistratu zen intsektizidaren eraginpean egon eta 24 ordura. Eltxo guztiak disekzionatu eta aztertu ziren espezieen identitatea berresteko. Prozedura bera egin zen F1 ondorengo euliekin. Lurrera botatzeko eta hilkortasun-tasak erregistratu ziren esposizioaren ondoren 24 ordura. Kontrol-botiletako hilkortasuna % 5 baino txikiagoa bazen, ez zen hilkortasun-zuzenketarik egin errepikapenetan. Kontrol-botilako hilkortasuna % 5 ≥ eta % 20 ≤ bazen, errepikapen horren proba-botiletako hilkortasuna Abbott-en formula erabiliz zuzendu zen. Kontrol-taldeko hilkortasuna % 20tik gorakoa bazen, proba-talde osoa baztertu zen [24, 25, 26].
P. argentipes eltxo basatietan harrapatutakoen batez besteko hilkortasuna. Errore-barrek batez bestekoaren errore estandarrak adierazten dituzte. Bi lerro horizontal gorrien eta grafikoaren arteko elkarguneak (% 90eko eta % 98ko hilkortasuna, hurrenez hurren) erresistentzia garatu daitekeen hilkortasun-leihoa adierazten du.[25]
P. argentipes basatian harrapatutako F1 ondorengoen batez besteko hilkortasuna. Errore-barrek batez bestekoaren errore estandarrak adierazten dituzte. Bi lerro horizontal gorriek gurutzatzen dituzten kurbek (% 90eko eta % 98ko hilkortasuna, hurrenez hurren) erresistentzia garatu daitekeen hilkortasun-tartea adierazten dute [25].
Kontrol/IRS gabeko herrixkako (Manifulkaha) eltxoak intsektizidekiko oso sentikorrak zirela ikusi zen. Eltxo basatian harrapatutako eltxoen batez besteko hilkortasuna (±SE) % 99,47 ± 0,52 eta % 98,93 ± 0,65 izan zen, hurrenez hurren, eta F1 ondorengoen batez besteko hilkortasuna % 98,89 ± 1,11 eta % 98,33 ± 1,11 izan zen, hurrenez hurren (2. eta 3. taulak).
Ikerketa honen emaitzek adierazten dute zilarrezko hankako euliek erresistentzia garatu dezaketela piretroide (SP) α-zipermetrina sintetikoarekiko (SP) α-zipermetrina ohiko erabileran dagoen herrietan. Aitzitik, IRS/kontrol programak hartzen ez dituen herrietatik bildutako zilarrezko hankako euliek oso sentikorrak direla ikusi da. Euli basatien populazioen sentikortasuna kontrolatzea garrantzitsua da erabilitako intsektiziden eraginkortasuna kontrolatzeko, informazio horrek intsektiziden erresistentzia kudeatzen lagun baitezake. DDTarekiko erresistentzia maila altuak aldizka jakinarazi dira Bihar-eko eremu endemikoetako eulietan, intsektizida hau erabiltzen duen IRSak egindako hautespen presio historikoagatik [1].
P. argentipes oso sentikorra dela ikusi genuen piretroideekiko, eta Indian, Bangladeshen eta Nepalen egindako landa-probek erakutsi zuten IRSak eraginkortasun entomologiko handia zuela zipermetrinarekin edo deltametrinarekin konbinatuta erabiltzen zenean [19, 26, 27, 28, 29]. Duela gutxi, Roy et al.-ek [18] jakinarazi zuten P. argentipesek erresistentzia garatu zuela piretroideekiko Nepalen. Gure landa-suszeptibilitatearen ikerketak erakutsi zuen IRSaren eraginpean ez zeuden herrietatik bildutako zilarrezko hankako euliek oso sentikorrak zirela, baina IRS tartekatu/lehenagoko eta IRS jarraituko herrietatik bildutako euliek (hilkortasuna % 90etik % 97ra bitartekoa izan zen, Anandpur-Haruniko euliek izan ezik, esposizioaren ondorengo 24 orduetan % 89,34ko hilkortasuna izan baitzuten) ziurrenik erresistenteak zirela zipermetrin oso eraginkorrarekiko [25]. Erresistentzia hau garatzeko arrazoi posible bat barruko ihinztadura arruntek (IRS) eta kasuetan oinarritutako tokiko ihinztadura programek eragindako presioa da, eta hauek kala-azar agerraldiak kudeatzeko prozedura estandarrak dira eremu/bloke/herri endemikoetan (Agerraldien Ikerketa eta Kudeaketarako Prozedura Operatibo Estandarra [30]. Ikerketa honen emaitzek zipermetrina oso eraginkorraren aurkako presio selektiboaren garapenaren hasierako adierazleak ematen dituzte. Zoritxarrez, eskualde honetako sentikortasun historikoaren datuak, CDC botilen bioanalisia erabiliz lortuak, ez daude eskuragarri konparaziorako; aurreko ikerketa guztiek P. argentipes-en sentikortasuna kontrolatu dute OMEren intsektizidaz bustitako papera erabiliz. OMEren proba-zerrendetan dauden intsektiziden dosi diagnostikoak malariaren bektoreen (Anopheles gambiae) aurka erabiltzeko intsektiziden identifikazio-kontzentrazioak dira, eta kontzentrazio horien aplikagarritasun operatiboa ez dago argi, euliek eltxoek baino maizago hegan egiten baitute eta substratuarekin kontaktuan denbora gehiago ematen baitute bioanalisian [23].
Nepalgo VL endemiko eremuetan piretroide sintetikoak 1992az geroztik erabili dira, alfa-zipermetrina eta lambda-zihalotrina SPekin txandakatuz euliaren kontrola egiteko [31], eta deltametrina ere erabili da Bangladeshen 2012az geroztik [32]. Erresistentzia fenotipikoa detektatu da hanka zilarrezko euliaren populazio basatietan, piretroide sintetikoak denbora luzez erabili diren eremuetan [18, 33, 34]. Mutazio ez-sinonimo bat (L1014F) detektatu da Indiako euliaren populazio basatietan eta DDTarekiko erresistentziarekin lotu da, eta horrek iradokitzen du piretroideen erresistentzia maila molekularrean sortzen dela, DDTak eta piretroideak (alfa-zipermetrina) intsektuen nerbio-sistemako gene bera baitute jomugan [17, 34]. Beraz, zipermetrinarekiko sentikortasunaren ebaluazio sistematikoa eta eltxoen erresistentziaren jarraipena ezinbestekoak dira desagerrarazteko eta desagerrarazteko aldietan.
Ikerketa honen balizko muga bat da CDCren ontziko bioanalisia erabili dugula sentikortasuna neurtzeko, baina konparazio guztiek OMEren bioanalisi kit-a erabiliz egindako aurreko ikerketen emaitzak erabili dituzte. Bi bioanalisien emaitzak agian ez dira zuzenean konparagarriak izango, CDCren ontziko bioanalisiak diagnostiko-aldiaren amaieran murrizketa neurtzen duelako, eta OMEren kit-aren bioanalisiak, berriz, esposizioaren ondorengo 24 edo 72 orduetan hilkortasuna neurtzen duelako (azken hau ekintza moteleko konposatuetarako) [35]. Beste balizko muga bat ikerketa honetako IRS herrien kopurua da, IRS ez den herri batekin eta IRS ez den/IRS ohi batekin alderatuta. Ezin dugu suposatu barruti bateko herrietan banaka behatutako eltxo bektoreen sentikortasun maila Bihar-eko beste herri eta barruti batzuetako sentikortasun mailaren ordezkari denik. India leuzemia birusaren ezabatze osteko fasean sartzen den heinean, ezinbestekoa da erresistentziaren garapen esanguratsua saihestea. Barruti, bloke eta eremu geografiko desberdinetako euli-populazioen erresistentziaren jarraipen azkarra beharrezkoa da. Ikerketa honetan aurkeztutako datuak behin-behinekoak dira eta Osasunaren Mundu Erakundeak [35] argitaratutako identifikazio-kontzentrazioekin alderatuz egiaztatu beharko lirateke, P. argentipes-en sentikortasun-egoeraren ideia zehatzagoa lortzeko eremu horietan, bektoreen kontrol-programak aldatu aurretik, euli-populazio baxuak mantentzeko eta leuzemia-birusa ezabatzen laguntzeko.
P. argentipes eltxoak, leukosi birusaren bektoreak, zipermetrina oso eraginkorrarekiko erresistentziaren hasierako zantzuak erakusten has daitezke. Bektoreen kontrolerako esku-hartzeen eragin epidemiologikoa mantentzeko, beharrezkoa da P. argentipes-en populazio basatien intsektiziden erresistentziaren aldizkako jarraipena egitea. Ekintza-modu desberdineko intsektiziden txandakatzea eta/edo intsektizida berrien ebaluazioa eta erregistroa beharrezkoak eta gomendatzen dira intsektiziden erresistentzia kudeatzeko eta Indian leukosi birusa ezabatzen laguntzeko.
Argitaratze data: 2025eko otsailaren 17a